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生物科研服务

微生物基因编辑技术服务

主页 科研服务 微生物基因编辑
01

项目咨询

沟通菌株与编辑需求

02

方案设计

sgRNA / 同源臂设计

03

编辑构建

Red 同源重组 / CRISPR

04

验证交付

PCR 与测序鉴定

微生物基因编辑

什么是微生物基因编辑?

微生物基因编辑是利用 Red 同源重组系统、CRISPR/Cas9 等前沿分子生物学技术,对细菌、真菌等微生物的基因组进行精准定向改造的技术手段。可实现基因敲除(KO)、基因敲入(KI)、点突变(Point Mutation)、基因回补(Complementation)等多种编辑策略,广泛应用于细菌致病机制研究、代谢工程、疫苗开发及抗菌药物筛选等领域。

我们拥有丰富的大肠杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、假单胞菌等多种模式及临床菌株的基因编辑经验,可根据研究需求定制个性化编辑方案,提供从构建到验证的全程技术服务。

服务类型

过表达构建

基因过表达稳转株/菌株

基因敲除

敲除 + 回补验证实验

基因回补

敲除株功能回补实验

基因敲除细胞

真核细胞基因敲除服务

点突变细胞

定点突变细胞系构建

基因敲入细胞

外源基因敲入稳转株

过表达稳转株

稳定过表达细胞系

干扰稳转株

RNAi 干扰稳转细胞株

载体构建

克隆载体设计与构建

支持菌株类型

我们提供多种革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌的基因编辑服务,覆盖常见模式菌株及临床分离株。

革兰氏阴性菌 — 肠杆菌科

  • 大肠杆菌(E. coli)— DH5α、TOP10、BL21(DE3)、JM109 等常用菌株
  • 鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)— 致病机制研究、疫苗开发
  • 肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)— 耐药机制与毒力因子研究
  • 其他肠杆菌科细菌(Enterobacteriaceae)— 根据需求定制

革兰氏阳性菌

  • 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)— MRSA 致病机制、抗菌药物筛选
  • 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)— 益生菌开发、芽孢形成机制

非发酵革兰氏阴性菌

  • 假单胞菌属(Pseudomonas spp.)— 铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)等,生物被膜研究
  • 根瘤菌属(Rhizobium spp.)— 共生固氮机制研究

技术平台与方法

Red 同源重组

lambda Red 系统介导的快速基因敲除

CRISPR/Cas9

高精度基因组定点编辑系统

自杀质粒法

双质粒系统进行无痕敲除

突变回补

点突变与功能回补验证

标准工作流程

1

靶基因分析与方案设计

根据研究目的确定编辑策略,设计同源臂序列或 sgRNA,评估脱靶风险,制定最优实验方案。

2

编辑元件构建

构建含同源臂的打靶载体或 CRISPR 编辑质粒,转化宿主菌株,进行抗性筛选与单克隆分离。

3

筛选与验证

通过 PCR 鉴定、酶切分析与 DNA 测序(Sanger 测序)确认基因组水平的成功编辑,必要时进行 Western blot 或 RT-qPCR 验证敲除效果。

4

表型验证(如需)

可进一步提供生长曲线测定、药物敏感性检测、致病性评估等下游功能验证服务。

应用研究领域

  • 细菌致病因子与毒力基因功能研究
  • 抗生素耐药机制与新型抗菌药物筛选
  • 代谢工程与生物合成途径改造
  • 益生菌与益生元功能性改造
  • 微生物疫苗候选株开发
  • 环境微生物与工业微生物菌种改良

交付标准

交付编辑成功的菌株甘油冻存管(≥2 支),提供构建报告(含编辑策略、测序峰图、PCR 鉴定结果)及原始实验记录。后续可延伸提供回补实验、功能验证等增值服务。

常见问题

我们目前支持大肠杆菌、沙门菌属(鼠伤寒沙门菌等)、克雷伯菌属(肺炎克雷伯杆菌)、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、假单胞菌及根瘤菌等多种常见微生物。其他特殊菌株请联系我们评估可行性。
标准基因敲除项目周期为 2–4 周,取决于菌株种类与编辑难度。点突变构建约 1–2 周,过表达载体构建约 1–2 周。复杂项目(如多基因敲除)周期相应延长。
支持。客户提供临床分离菌株后,我们会进行菌株背景评估,确定适用的编辑系统(Red 同源重组、CRISPR 或自杀质粒系统),确保编辑成功率。
提供。可在敲除株中回补野生型基因或突变体基因,通过表型恢复验证目标基因功能,支持双等位基因回补实验设计。