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生物科研服务

细胞生物学实验服务

主页 科研服务 细胞实验
01

样本接收

细胞株/组织样本接收

02

实验设计

方案制定与预实验

03

实验执行

标准化细胞实验操作

04

数据分析

图像采集与定量分析

细胞实验

细胞实验服务概述

我们提供全方位细胞生物学实验技术服务,涵盖从原代细胞分离培养到稳转细胞系构建、功能检测的完整链条。配备万级洁净细胞房、高端倒置荧光显微镜与流式细胞仪,可满足各类肿瘤细胞、原代细胞的培养与实验需求。

服务项目

原代细胞分离培养

组织取材、酶消化、差速贴壁分离与培养鉴定

细胞系 STR 鉴定

24 个位点 STR 分型,鉴定细胞系交叉污染与身份

慢病毒包装

第四代包装系统,高滴度重组慢病毒生产

稳转细胞系建立

慢病毒/质粒转染,嘌呤霉素/杀稻瘟菌素筛选

质粒转染

脂质体、电转等多种转染方法

CCK8 细胞活力

细胞增殖与药物毒性高通量检测

细胞克隆形成

软琼脂克隆形成、平板克隆形成实验

EdU 细胞增殖

Click-iT EdU 检测,活细胞 DNA 合成分析

细胞划痕实验

伤口愈合检测,定量分析细胞迁移能力

细胞侵袭实验

Transwell Matrigel 侵袭检测肿瘤转移能力

细胞迁移实验

Transwell 迁移检测细胞运动能力

核心技术详解

原代细胞分离培养与鉴定

可从多种组织(肝、脑、心肌、肿瘤等)分离原代细胞,采用胶原酶/胰酶消化法结合差速贴壁技术,获得高活率原代细胞。通过形态学观察、特定标记物免疫荧光或流式鉴定细胞纯度与活性。

细胞系 STR 鉴定

依据 ATCC 标准,采用 24 个核心 STR 位点进行细胞身份鉴定,检测交叉污染与支原体,排除 HeLa 等常见错误识别细胞系问题,确保实验用细胞可溯源。

慢病毒包装与稳转株构建

采用第四代包装系统(pLP1、pLP2、pLP/VSVG)包装重组慢病毒,病毒滴度可达 10⁸ TU/mL 以上。通过嘌呤霉素/杀稻瘟菌素(Blasticidin)/潮霉素(Hygromycin)梯度筛选建立稳定表达细胞系。

CCK8 细胞活力检测

WST-8 法检测细胞增殖与药物毒性,灵敏度高于 MTT 法,无需 DMSO 溶解步骤,适合高通量药物筛选。可绘制细胞生长曲线、计算 IC₅₀ 值。

细胞划痕 / 迁移 / 侵袭

划痕实验(Wound Healing)检测二维迁移能力;Transwell 迁移实验定量检测细胞趋化运动能力;Matrigel 侵袭实验模拟细胞穿越基底膜的侵袭能力,是肿瘤转移研究的核心技术。

标准实验流程

1

样本接收与细胞培养

接收冻存细胞株或新鲜组织样本,进行复苏、传代与培养,建立稳定的细胞工作种子库,监控细胞状态与支原体检测。

2

转染 / 病毒感染

根据实验需求选择质粒脂质体转染或慢病毒感染,优化感染复数(MOI)与嘌呤霉素筛选浓度,建立稳转细胞系。

3

功能实验检测

根据实验设计执行 CCK8、克隆形成、EdU、划痕、Transwell 等功能实验,设置复孔与生物学重复,确保数据可靠性。

4

图像采集与数据分析

使用倒置荧光显微镜或高内涵成像系统(ImageXpress)采集图像,ImageJ/GraphPad Prism 进行定量统计分析与图表制作。

应用研究领域

  • 肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡分子机制研究
  • 抗肿瘤药物筛选与 IC₅₀ 测定
  • 基因功能研究(过表达/敲降细胞系的表型验证)
  • 信号通路抑制剂药效评估
  • 细胞应激与死亡机制研究(凋亡、自噬、铁死亡等)
  • 原代细胞与临床样本的体外药理学研究

数据交付标准

交付完整实验报告(含原始数据、图像、统计结果)与处理后的分析图表。稳转细胞系交付 2 管高纯度细胞株与构建报告(含荧光表达验证)。所有原始数据可溯源,符合期刊数据可用性要求。

常见问题

可以。我们可从新生鼠或胚胎鼠脑组织分离原代神经元,从新生鼠心脏分离原代心肌细胞。通过特异性标记物(NeuN、MAP2 for neurons; cTnT、α-Actinin for cardiomyocytes)进行免疫荧光鉴定。
慢病毒包装约 1–2 周,稳转株筛选与鉴定约 2–3 周。整体周期约 3–5 周,包括预实验优化 MOI、病毒包装、感染、筛选与验证全流程。
可以。支持 shRNA 文库、混合克隆或单克隆筛选。可根据需求定制单基因、双基因或多基因共敲降稳转株。亦可提供 CRISPR sgRNA 文库慢病毒包装服务。
常用细胞系包括 HEK-293T、A549、HepG2、HeLa、MCF-7、SK-BR-3、HT-29、SW480、U251、U87 等。也可根据客户需求使用特定细胞系,所有细胞系均经过 STR 鉴定确认。